简捷型集菌仪的操作流程需庄苛遵从无菌操作准则,主题环绕 “仪器计算→样品管束→过滤拘押→培育查看” 开展,的确步伐适配无菌查抄或微生物限定查抄需求,细节如下:
操作需正在干净区(如百级超净台)或无菌处境中举行,提前 30 分钟开启超净台及紫外消毒灯,对操作台面、用具消毒;
计算配套的一次性集菌培育器(含滤膜,孔径 0.45μm 或 0.22μm,遵照检测需求拔取)、无菌打针器 / 移液管、稀释液(无菌心理盐水或磷酸盐缓冲液)、培育基(硫乙醇酸盐流体培育基用于需氧 / 厌氧菌,纠正马丁培育基用于真菌)。
查抄简捷型集菌仪外观,确认电源、蠢动泵头无破损,锂电池电量充塞(或接通电源);
开启仪器,扶植参数:转速(日常调理为 80~120rpm,遵照样品黏度调节)、运转形式(准时或继续运转),空载试运转 1~2 分钟,确认泵头转动安定、无相当噪音。
拆开一次性集菌培育器包装,无菌操作下将培育器进样口与样品管途结合,出液口结合排液管(排液管末了置于无菌废液桶);
将培育器卡入集菌仪的蠢动泵头卡槽,确保管途贴合泵头滚轮(避免管途扭曲或漏气),轻轻压紧泵头压盖。
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液体样品(如打针剂、纯化水):若样品为无菌制剂,直接取轨则体积(如 100mL)通过无菌打针器注入集菌培育器进样口;若样品含抑菌因素,需参加适量中和剂(如 β- 内酰胺酶中和青霉素类),或采用薄膜过滤法屡屡冲洗滤膜(用 300~500mL 稀释液冲洗)。
固体样品(如食物、中药材):取样品适量,参加无菌稀释液制成匀浆,经无菌滤膜(粗滤)去除大颗粒杂质后,取滤液注入集菌培育器。
按下仪器 “启动” 键,蠢动泵运转策动样品通过滤膜,微生物被拘押于滤膜轮廓;
过滤经过中查看流速,若流速过慢(如样品黏度高),可适合升高转速(不高出 150rpm),避免滤膜停顿;若显现漏液,随即停机,查抄管途结合是否慎密。
对付含抑菌因素的样品,过滤告终后,用无菌稀释液分 3~5 次冲洗滤膜(每次 50~100mL),填塞洗脱抑菌物质,避免影响后续微生物成长。
过滤及冲洗告终后,合上集菌仪,无菌操作下向集菌培育器中注入溶化并冷却至 45~50℃的培育基(硫乙醇酸盐流体培育基约 100mL,或纠正马丁培育基约 80mL);
轻轻摇晃培育器,使培育基平均笼盖滤膜,确保无气泡残留(气泡会遮挡微生物成长)。
将集菌培育器从仪器上取下,密封培育器端口,置于对应温度的培育箱中:需氧 / 厌氧菌培育温度 30~35℃,培育时辰 5 天;线 天;
培育时候逐日查看培育基是否污染(或有无菌完成长),若显现污染,取培育液涂片镜检,或转种至固体培育基审定微生物品种。
合上仪器电源,拆卸集菌培育器(按医疗废物管束),用 75% 酒精擦拭蠢动泵头、卡槽及仪器轮廓,去除残留液体或污染物;
若培育基澄清无污染,占定为 “无菌查抄及格”;若显现污染或菌完成长,需进一步确认是否为样品污染(倾轧操作污染后,占定为不足格)。
分别样品(如油性制剂、高盐样品)需拔取适配的滤膜材质(如疏水性滤膜适配油性样品),避免滤膜溶化或停顿。